發行日期 2018-05-03 第42期

蛋白彼此有交互作用嗎 ?  

用分子篩層析法 (GFC) 告訴你！

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友和電子報

蛋白交互作用--利用分子篩層析法，不僅可以驗證，還可以製備~

分子篩層析法又稱凝膠過濾法 ( Gel Filtration Chromatography)。其原理很簡單：根據蛋白或其他生物分子的大小對其加以區分，大蛋白會先出峰，小蛋白較晚出峰。假若兩個蛋白之間存在直接相互作用，其在凝膠過濾上的出峰時間理論上就會提前，如下圖所示，以此方法就可驗證蛋白間是否存在相互作用，或者說是形成複合物。由於此方法處理量比較大，還可以在驗證的同時進行蛋白複合物的製備。此外，利用這原理，凝膠過濾還可以用來對未知蛋白進行分子量測定或者對複雜樣品進行分子量分佈的研究。

Analysis of protein-protein interaction

利用  Superdex 200 Increase 10/300 GL 管柱監測複合物的形成。胰蛋白酶和大豆胰蛋白酶抑製劑以及兩者的混合物分別在管柱上運行，三次運行的色譜圖重疊如右圖所示
。相對應於  Trypsin  (紅色峰) 及 Soy trypsin inhibitor (藍色峰) 的出峰時間，兩者混合物因有交互作用形成了複合物大分子，移動速度快，為最早洗脫出的綠色峰 。

GE  新一代 Increase 系列分子篩管柱

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