一般 Oilgo常見問題

• 發單與原廠截止收件時間?
• Oligo價目表?
• 工作天數和到貨天數?
• 如何選擇純化方式?
• 保存溫度和保存期限?
• 如何配製100uM濃度?
• 原廠有無提供annealing的服務?
• 原廠Liquid form是以何種溶液回溶?
• 可否在同一個位置選擇A/T或是A/T/C/G?
• 如何在下單時備註緊急訂單?
• 如何取消或更改訂單?

siRNA 常見問題

• Proligo siRNA優勢?
• 需要配合轉染試劑嗎?
• 可否提供對照組序列?
• 如何請原廠設計? 需要收費嗎?
• 原廠設計和合成需要幾個工作天?
• 原廠siRNA網頁資訊網址?
• 原廠有沒有已經設計好的siRNA序列?

◆ 發單與原廠截止收件時間?

收到網路訂單隨時發單，原廠每日截止時間為11:00AM，超過時間就算是隔日訂單。

◆ Oligo價目表?

請洽分機02-26006699#832 邱小姐

◆ 工作天數和到貨天數?

【標準引子】DNA、序列小於25mer、2OD/5OD、不純化以及無修飾且為Liquid，只需要1個工作天。
                    到貨另加2天，故第三天送達您實驗室。
【純化】以標準長度為例，RPC需2個工作天；HPLC純化3-5個工作天；PAGE純化需3個工作天。
【產量】產量超過5OD，另增1-2個工作天。
【長度】長度超過標準長度，視長度而定，另增1-3個工作天。
【修飾引子】以標準長度、不純化為例，需3-4個工作天。
【特殊引子】需7-10個工作天。
【siRNA】請見siRNA常見問題。
【非標準訂單】需詢問原廠。
工作天數另加2天即為到貨時間。
*若遇到QC沒過需重新合成或是Fedex班機延誤，到貨時間以實際狀況為準。

◆ 如何選擇純化方式?

Selecting the Best Purification Method for Your Oligo

◆ 保存溫度和保存期限?

請參考產品所附文件之背頁：溶液可在室溫下穩定1-2周，長期保存建議於-20°C(或-80°C)，但避免重複回溫解凍。
保存狀況良好下，Proligo保證有6個月的效期，但是可穩定保存2年以上。
螢光探針需避光和避免空氣接觸。

◆ 如何配製100uM濃度?

您需參考產品所附文件上濃度，假設為24nmole，24*10=240，您只要回溶體積為240ul，濃度即為100uM。

◆ 原廠有無提供annealing的服務?

除了siRNA有提供duplex服務，其他合成沒有提供annealing服務，annealing protocol可參考附件資料。

◆ 原廠Liquid form是以何種溶液回溶?

原廠以ddH2O回溶。

◆ 可否在同一個位置選擇A/T或是A/T/C/G?

可以，國際通用鹼基代碼請見附件。

◆ 如何在下單時備註緊急訂單?

請在Comment備註: Urgent，並寫下希望收到貨的日期。在合理範圍工作天數前提下，我們會幫您跟原廠爭取。

◆ 如何取消或更改訂單?

因為訂單隨時發出，如果訂單有問題，請立即來電告知。
在原廠尚未確認訂單前才可以作取消，若原廠已進行合成，無法作任何更動，敬請原諒。

◆ Proligo siRNA優勢?

◎ Rosetta Design 專業團隊針對一個標的基因，提供 3條 siRNA設計保證有2條成功，抑制基因表現成功率超過75%。
◎ 未純化的siRNA 品質媲美已純化的siRNA，可有效率抑制基因表現。不需選擇純化，經費更省。
◎ siRNA設計服務完全免費。
◎ siRNA 合成工作天數短。

◆ 需要配合轉染試劑嗎?

如果您的 cell line 是屬於比較難轉染，建議考慮 N2913, N-TER Nanoparticle siRNA Transfection System。
N-TER 奈米微粒siRNA轉殖系統是以胜肽為基礎的系統應用於真核生物基因表現暫時性基因敲除。
N-TER胜肽與siRNA以非共價鍵結形成奈米微粒。
此奈米微粒會與細胞膜表面的脂質交互作用，讓奈米微粒通過細胞膜並將siRNA直接送進細胞質。
不像多數脂質為基礎的方法，此系統繞過endosomal pathway，降低siRNA被隔離或分化的可能性。 已驗證過的細胞株，參考網址。

◆ 可否提供對照組序列?

Negative control :

Firefly luciferase GL2

CGUACGCGGAAUACUUCGAdTdT (sense)

UCGAAGUAUUCCGCGUACGdTdT (antisense)

S. M. Elbashir, J. Harborth, W. Lendeckel, A. Yalcin, K. Weber & T. Tuschl, Nature (2001) 411:494-498

Firefly luciferase GL3

CUUACGCUGAGUACUUCGAdTdT (sense)

UCGAAGUACUCAGCGUAAGdTdT (antisense)

S. M. Elbashir, J. Harborth, W. Lendeckel, A. Yalcin, K. Weber & T. Tuschl, NATURE (2001) 411:494-498

Renilla luciferase

AAACAUGCAGAAAAUGCUGdTdT (sense)

CAGCAUUUUCUGCAUGUUUdTdT (antisense)

S. M. Elbashir, J. Harborth, W. Lendeckel, A. Yalcin, K. Weber & T. Tuschl, NATURE (2001) 411:494-498

EGFP

GCAAGCUGACCCUGAAGUUCAU (sense)

GAACUUCAGGGUCAGCUUGCCG (antisense)

N. J. Caplen, S. Parrish, F. Imani, A. Fire, and R. A. Morgan, PNAS (2001) 10.1073

Positive control :

Lamin A/C

CUGGACUUCCAGAAGAACAdTdT (sense)

UGUUCUUCUGGAAGUCCAGdTdT (antisense)

S. M. Elbashir, J. Harborth, W. Lendeckel, A. Yalcin, K. Weber & T. Tuschl, Nature (2001) 411:494-498

◆ 如何請原廠設計? 需要收費嗎?

設計完全免費。
請至設計服務
siRNA有兩個選項，一般建議選 Rosetta Design。
Rosetta Design 專業團隊針對一個標的基因，提供3條 siRNA 設計並保證有2條成功，抑制基因表現成功率超過70%。
因為設計完畢後由 Proligo 直接合成，需直接跟我們下單，請在 Comment 欄位備註:例如2OD desalted duplex siRNA。
由於原廠設計一次三條，無法提供只設計一條的服務，敬請見諒。
In house Design 由 SIGMA 原廠設計，針對標的基因提供3條siRNA設計，並在您訂購時每條提供 5 positive and negative controls。
如果希望先看到序列，請選 In house Design，但是沒有 Rosetta Design 3條2條成功的保證。
以下為填寫必塡欄位
２、gene accession number, gene abbreviation or sequences 基因序號或序列
３、Species物種
塡好後送出即可

◆ 原廠設計和合成需要幾個工作天?

設計需要1-3天，若以duplex siRNA為例，工作天數約6天，總計約9個工作天。

◆ 原廠siRNA網頁資訊網址?

http://www.sigmaaldrich.com/Brands/Sigma_Genosys/siRNA_Oligos.html

◆ 原廠有沒有已經設計好的siRNA序列?

有的，Mission siRNA， 可在Sigma-Aldrich網站首頁 Your Favorite Gene 搜尋到資料庫。
輸入您要搜尋的基因名稱，例如 tumor necrosis factor (TNF)，即可搜尋到siRNA資料庫。
訂貨方式同Proligo設計服務下單方式，選 siRNA 後在Comment備註：siRNA ID以及２or５OD desalted duplex siRNA，送出資料即可。